Ядерная экспрессия ki 67. Иммуногистохимическое исследование (ER, PR, her2neu, ki67, p53 и др)

Онкологическая опухоль при своем формировании вырабатывает некие биообъекты – онкомаркеры, которые образуются в теле больных раком. Это свойство онкологических клеток полезно при диагностике рака и контроля результатов лечения. Анализы на онкомаркеры рака молочной железы (РМЖ) сдаются по строгим правилам, на результат воздействуют некоторые факторы.

Что такое опухолевый маркер

Специальные белки, гормоны, антигены или их составляющие всегда выделяются организмом при формировании раковой опухоли. Эти компоненты у ракового больного по своему количеству кардинально отличаются от объема веществ, вырабатывающихся здоровым организмом. Если у пациента , количество онкомаркеров стремительно растет, что не останется незамеченным при правильно взятом анализе. Всего на сегодня выявлено более 200 видов онкомаркеров, в практике их используется гораздо меньше.

Онкологические новообразования по своей природе разные, по этой причине у них разные онкомаркеры. Иногда количество онкомаркеров повышается у человека, у которого нет рака, поэтому данный анализ нельзя считать окончательным приговором – это своеобразный экспресс-тест, заменяющий собой множество других исследований. Наличие специфических белков определенного рода показывает, в каком органе находится патология. Это принципиально важно для выявления злокачественной опухоли, характеризующейся быстрым ростом и прорастанием метастаз.

Первый онкомаркер был обнаружен в 1845 году, современная медицина использует для диагностики около 20 специфических белков. Отдельные опухоли производят не один, а несколько онкомаркеров. Поскольку в некотором количестве эти вещества выделяются в состояниях, не имеющих отношения к раку, то сегодня их больше используют не для выявления онкологии, а для оценки динамики оперативного или терапевтического лечения. Некоторые онкомаркеры выявляются в моче у беременных, менструирующих, пациентов с гепатитом, циррозом, заболеваниями почек доброкачественной природы. Плохой первый анализ на онкомаркеры не обязательно доказывает то, что у человека рак – такой пациент просто попадает в группу риска, диагностика продолжается другими способами. Если при повторных анализах онкомаркер продолжает расти – это неблагоприятный сигнал. После оперативного вмешательства по удалению раковой опухоли этот метод позволяет контролировать возможность рецидива.

После лечения онкологии пробы крови на выявление онкомаркеров берутся по следующей схеме.

• I год после лечения – каждые 30 дней.
• II год – каждые 60 дней.
• III-V год – каждые 6 месяцев.
• VI год и далее – каждые 12 месяцев.

Нужно учитывать, что отклонения в одном или нескольких онкологических маркеров возникают у 85% пациенток, больных раком, но это не всегда доказательство роста увеличения опухоли. Наличие в крови онкомаркеров – предположительный признак рака. Поэтому для обнаружения онкологии они показаны не всегда, это подвергается сомнению многими специалистами. Примером может служить гормон ХГЧ, который является маркером для рака органов малого таза. Одновременно повышение ХГЧ – это нормальный признак беременности. Виды онкомаркеров подразделяют по типу ткани, в которых их обнаруживают: сывороточные, тканевые, генетические.

Расшифровка анализа

У многих пациенток с метастазами в молочных железах в сыворотке обнаруживаются антигены. Особенно информативен СА 15-3, в таких случаях он повышается в пределах 40ЕД/мл. Маркер СА 27.29 повышается более 41ЕД/мл при развитии карциномы. Если после лечения эти цифры не приходят к нормальному значению, это является свидетельством неправильной лечебной тактики, заболевание будет прогрессировать. Онколог примет решение об изменении леченой схемы, потому что выбранный метод оказался неэффективным.

Грамотная расшифровка онкомаркеров позволит выяснить форму и вид онкологии, степень распространенности метастаз и стадию болезни. При появлении в плазме крови онкомаркера Her2Neu нужно использовать медпрепараты для блокировки белкового синтеза и приостановки роста онкологических образований. Тест на онкомаркеры помогает понять реакцию тела на использование лекарственных средств. По итогам лабораторного исследования врач принимает решение о продолжении лечения или смене лечебной тактики, переходе на химиотерапию.

При повышении опухолевых маркеров у беременных на позднем сроке грамотный врач заподозрит у нее хронический гепатит или системное заболевание (наподобие красной волчанки). Онкологические маркеры – это не абсолютные показатели рака, поэтому для полного обследования груди обязательно назначают маммографию, которая более информативна, особенно на начальных этапах роста новообразования.

При узловом типе онкологии груди маркер СА15-3 довольно точно позволяет распознать вид и место локализации новообразования. Диагноз узловой формы подтверждается предварительным визуальным наблюдением: на груди при пальпации обнаруживается уплотнение или бугорки под сосками. Одновременно выделяется жидкость (бывает разных цветов), соски деформируются, иногда развивается онкология по типу рожистого дерматологического заболевания.

ER / PR (эстрогеновые и прогестероновые рецепторы)

Стимулировать рост опухоли могут отдельные субстанции организма. При раке груди такими субстанциями выступают гормоны, особенно негативно действует на организм пациентки избыток эстрогенов. Доказано, что удаление яичников оказывает защитный эффект у пациенток с онкологией молочных желез. Понимание этого механизма привело к такому методу лечения, как . Назначенные женщине антиэстрогены блокируют выработку эстрогенов у пациентки, снижая уровень этих гормонов в организме. Принимаются такие медпрепараты в течение нескольких лет, в результате опухоль, лишенная подпитки, больше не растет, а иногда даже рассасывается.

ER – эстрогеновый, а PR – прогестероновый рецептор, они обязательно проверяются у всех больных с онкологией груди, но повышенный их уровень обнаруживается только у 75% случаев. Взаимодействие этих рецепторов с гормоном эстрогеном стимулирует выживаемость раковых клеток. Прерывание функционирования яичников приводит к уменьшению уровня эстрогенов в десятки раз. Остановить работу женских яичников можно при помощи гормональной или радиационной терапии, а также с помощью операции.

В менопаузе эстрогены синтезируются из андрогенов, вырабатываемых надпочечниками. По этой причине блокада функции яичников не полностью снижает количество эстрогенов, требуется дополнительное воздействие на надпочечники. Тестирование ER/PR – стандартное исследование при опухоли груди, помогающее планировать объем лечения и контролировать вероятность рецидива.

Сырьем для исследования обычно является ткань опухоли, обработанная особым способом. Пациентки с обнаруженными и эстрогеновыми рецепторами в половине случаев оказываются чувствительными к лечению гормонами. При наличии только одного рецептора чувствительность к гормональной терапии намного хуже. Если оба этих рецептора отсутствуют в тканях опухоли, то лечение при помощи гормонов малоэффективно.

Her2Neu

Один из ценных маркеров при раке молочной железы – рецептор Her2. В здоровом организме этот рецептор в норме располагается во множестве клеток. У 25% пациенток с раком груди количество Her2 повышается. Избыток этого рецептора – достоверное свидетельство агрессивной формы онкологии грудной железы. Пациентки с положительным Her2 имеют негативный прогноз, выживаемость составляет обычно не более 2 лет с даты установки диагноза.

Все пациентки с диагнозом рак МЖ обязательно направляются на выяснение Her2-статуса – это очень важно для назначения правильного лечения. Сверка этого статуса помогает онкологу точнее определить тип новообразования, уточнить диагноз и назначить в случае необходимости срочную операцию по ампутации груди. Если у пациентки положительный Her2, то для нее наиболее эффективно назначение медпрепаратов с платиной и таксанов. Анализ на Her2 позволяет доктору решить вопрос с назначением таких серьезных медпрепаратов, как герцептин. Для проведения анализа проводится исследование ДНК тканей опухоли, взятых на биопсии, поэтому Her2 не используется для ранней диагностики.

Ki67

Этот антиген обнаруживается в клетке при ее делении. Если клетка не делится, обнаружить Ki67 (пролиферативный индекс) не удастся. Благодаря этому маркеру можно прогнозировать скорость роста опухоли. Для анализа берется часть ткани железы, взятый на биопсии или при операции. Когда маркер повышен сильно – это неутешительный прогноз, гормональное лечение помогает в этом случае малоэффективно, требуется комбинировать несколько лечебных методик.

Назначается этот онкомаркер при агрессивном течении заболевания наряду с другими маркерами. Комплексные данные по всем онкомаркерам позволят назначить наиболее эффективный план лечения. Если тест на Ki67 показал 0-20% – новообразование растет медленно. Если результат выше 20% – это быстро растущая опухоль. При высоком пролиферативном индексе назначается химиотерапия.

При Ki67 менее 10% выживаемость составляет около 95%. При увеличении индекса до 20% выживаемость пациенток снижается до 80%. Если антиген приближен к 100% – шансов мало, но отчаиваться нельзя, каждый врач в практике сталкивался со случаями, необъяснимыми по канонам медицины.

Белок p53

Клеточный цикл регулируется при помощи транскрипционным фактора, выраженного белком p53. Если клетки делятся слишком быстро, концентрация этого белка увеличивается. Это вызвано высоким риском озлокачествления этих клеток, а белок p53 способен предотвратить злокачественный процесс. У здоровой женщины антионкоген неактивен, он активируется только при повреждении ДНК.

При исследовании антионкоген p53 обнаруживается у половины злокачественных клеток, что позволяет раковой опухоли развиваться. Анализ на белок p53 проводится совместно с исследованием на антиген Ki67, чтобы точно выяснить степень агрессивности новообразования. Если уровень p53 повышен – это благоприятный показатель, указывающий на неагрессивное течение заболевания. При высоком уровне этого белка опухоль растет быстро, она склонна к образованию метастаз.

VEGF (фактор роста эндотелия сосудов)

Развитие опухоли во многом зависит от сосудистой сетки, ее питающей. Повышение васкуляризации образования связано с неблагоприятным прогнозом. Формирование новых капилляров происходит на основе уже существующих. Этот процесс хорошо описывается при помощи фактора роста эндотелия сосудов (VEGF). Фактор представлен несколькими видами белков, он повышается не только при онкологии, но и в период овуляции, менструальных выделений, беременности и увеличении артериального давления.

Активация рецепторов VEGF способствует выживанию клеток эндотелия, их перемещению и дифференцировке. В агрессивных формах рака индекс микрососудов 101 и больше, а в опухолях с медленным клиническим течением – 45. Плотность сосудов при агрессивной онкологии выше на 33%. Риск появления опасных метастазов увеличивается вдвое при индексе более 101. В этом случае можно использовать , приводящую к тому, что опухоль лишается питания. Следует учитывать, что иногда бывают ложноположительные результаты теста.

Определение экспрессии белков PD-1, PDL-1 и PDL-2

Совсем недавно появилось новое направление терапии в онкологии – иммунотерапия. Механизм метода в том, что специальные препараты-иммуномодуляторы позволяют иммунитету обнаружить и обезвредить опухоль. При наличии видимой опухоли телом синтезируются белки PD-1, PDL-1 и PDL-2 (но бывают и исключения). Поэтому одним пациентам иммуномодуляторы помогают, а для других – бесполезны.

Иммунохимическое исследование тканей играет важнейшую роль в современной медицине. Онкологи по наличию или отсутствию этих белков составляют грамотное лечение. Комбинации белков PD-1, PDL-1, PDL-2 грамотному врачу скажут многое по поводу прогноза выживаемости пациента.

Раково-эмбриональный антиген (РЭА)

Для выявления онкологических образований используется соединение белка и протеина, получившее название раково-эмбрионального антигена. Онкомаркер РЭА наблюдается еще и при внутриутробном развитии плода. У здоровых организмов антиген присутствует в крови тоже, но в небольших объемах.

РЭА повышен при выраженной онкологии, доброкачественных новообразованиях и некоторых аутоиммунных болезнях и воспалениях. Норма РЭА – до 3,8нг/мл, от употребления никотина показатель повышается до 6,0. При доброкачественной опухоли РЭА увеличивается до 10нг/мл. При раке показатель резко повышается значительно выше нормы. Обычно тест на этот антиген применяется для проверки эффективности противораковой терапии. Если показатель РЭА возвращается к норме – это доказательство результативности терапии и отсутствия рецидивов.

Кровь на обследования берется венозная. До анализа нужно не кушать 12 часов, а за час до исследования – исключить волнения и физнагрузки. Несколько часов перед сдачей крови нужно воздержаться от курения. Сдавать анализ придется несколько раз, в одной лаборатории с одинаковыми реактивами.

Муциновые (слизистые) гликопротеиды семейства MUC-1: CA 15-3, CA 27.29, CMA, CA 549, СА 125

Гликопротеины гетерогенного характера используется как онкомаркеры рака молочной железы группы MUC-1. Для исследования берется сыворотка крови. В малых концентрациях белок выделяется и в здоровом организме, но повышение показателя свидетельствует о раковых преобразованиях в яичниках или молочной железе. Беременность, кормление ребенка грудным молоком и некоторые доброкачественные заболевания тоже вызывают незначительное увеличение MUC-1.

• Антиген СА 15-3 обнаруживается в протоках молочной железы при онкологии груди. Норма СА 15-3 – до 20ЕД/мл. Высоким считают результат выше 30ЕД/мл. При воспалении желез и других доброкачественных образованиях наблюдается пороговый предел СА 15-3 – до 30ЕД/мл.
• Онкомаркер СА27.29 особенно популярен у американских специалистов. Российские доктора не так часто используют маркер по той причине, что он сильно повышается не только при раке, но и из-за кисты яичников, доброкачественных опухолей в почках и печени, гиперплазии эндометрия. У беременных СА27.29 всегда повышен – это норма.
• СА 549 – этот онкомаркер применяется для диагностики и контроля терапевтического эффекта совместно с тестом на РЭА. Для анализа на СА 549 требуется сыворотка крови, пограничным считают значение в 11ЕД/мл. Повышенный уровень СА 549 наблюдается также при воспалении железы и новообразованиях в печени, не имеющих онкологическую природу.
• Маркер СА 125 традиционно применяется для диагностики онкологии яичников, но и при патологиях груди он тоже информативен. У здоровой пациентки СА 125 изменяется в течение менструального цикла, поэтому анализ пересдается несколько раз. Нормальным считают значение до 35ЕД/мл. Умеренным считают повышение до 60ЕД/мл, что наблюдается не только на начальных стадиях рака, но и при гиперплазии эндометрия и гинекологических воспалениях, пневмонии, панкреатите, почечной и печеночной недостаточности. Повышение маркера до 100ЕД/мл и выше – свидетельство онкологии на этапе прогрессирования опухоли. СА 125 информативен при оценке эффективности противораковой терапии и для раннего обнаружения рецидива – маркер повышается на несколько месяцев раньше, чем появляются признаки метастаз.

Муциновые гликопротеиды MUC-1 не могут обеспечить надежную раннюю диагностику РМЖ. Главное значение этих маркеров – контроль результатов лечения и ранее обнаружение метастазирования, что значительно повышает выживаемость пациенток.

Тканевый полипептидный антиген (ТПА)

Этот маркер обязательно сдается при карциноме груди. Совместно с другими онкомаркерами рака грудной железы (обычно это РЭА или СА15-3) позволяет выявить опухоль на ранней стадии и следить за эффективностью противоракового лечения. Норма ТПА – 75ЕД/мл.

Тумор-М2-пируваткиназа (ПК-М2)

Появление этого онкомаркера в сыворотке – точное свидетельство раковой патологии в теле. Но ПК-М2 не отвечает на вопрос, какой именно орган поражен. Сдается анализ на онкомаркер для уточнения диагноза рака совместно с прочими онкомаркерами. Если другие онкомаркеры могут повышаться и при доброкачественной опухоли, то только результат ПК-М2 может уточнить, действительно ли это рак.

Нормой считают концентрацию ПК-М2 в крови меньше 15ЕД/мл. Если итог анализа показывает значения выше, то это свидетельствует об онкологии печени, почки, желудка, пищевода, кишечника или молочной железы. С помощью маркера ПК-М2 можно контролировать обострения и обнаруживать заранее появление метастаз после пройденного лечения.

Цитокератины (TPA, TPS)

В строении каждой клетки обязательно присутствуют состоящие из миниатюрных нитей и трубок цитокератины. Подъем онкомаркеров TPA/TPS наблюдается не только при онкологии грудной железы, но и злокачественных новообразованиях легкого, головы, шеи, кишечника. Четко прослеживается зависимость концентрации онкомаркера от стадии рака, а также от воспалительных заболеваний некоторых органов. Все это делает маркеры TPA/TPS достаточно неспецифическими и ограничивает их клиническую значимость.

Что является нормой

На современном уровне развития медицины ни один из онкомаркеров не может эффективно использоваться для раннего обнаружения рака. При уже выставленном диагнозе РМЖ чтобы оценить результат лечения, своевременно обнаружить рецидивы и возможность появления метастаз обычно используются онкомаркеры СА15-3, РЭА. При лечении медпрепаратом Герцептином обязательно проверяется онкомаркер Her2Neu – это общепризнанная методика.

При решении вопроса о назначении гормональной терапии пациентка направляется на анализ на выявление эстрогеновых рецепторов ER. Если в семье пациентки были случаи злокачественных опухолей в груди, ей рекомендуют пройти . У некоторых народностей, среди которых РМЖ чрезвычайно распространен, генетическое исследование проводится вне зависимости от истории заболеваемости родственников. При выявлении этих генов женщине предлагается профилактическая операция по удалению молочных желез. Именно так произошло с известной голливудской звездой Анджелиной Джоли, у которой мать и бабушка болели этим страшным заболеванием.

Часто используемые показатели нормы опухолевых маркеров в случае исследования пациенток без рака груди:

• ER, PR – не обнаруживаются;
• HER-2 не обнаруживаются;
• РЕА – до 3нг/мл;
• СА15-3 – до 28ЕД/мл;
• СА27.29 – до 40ЕД/мл.

Повышенная концентрация онкомаркеров не в 100% указывает на протекающую онкологию. При злокачественном образовании показания опухолевых онкомаркеров повышаются многократно. Расшифровывает анализ опытный маммолог-онколог, сама пациентка ради своего душевного спокойствия никогда не должна трактовать результаты, полученные в лаборатории – велика вероятность ошибки. Врач расшифровывает анализ с учетом клинических признаков и диагностических показаний других исследований.

Вопрос нормы онкомаркеров для пациенток с раком железы далеко неоднозначен, ответить на этот вопрос может только лечащий врач в конкретном клиническом случае. Для примера приведем состояние пациентки в ходе химио- и лучевой терапии – опухолевые маркеры в этот период резко повышаются. Это воспринимается онкологами как положительный признак – организм отреагировал на лечение. Когда опухоль разрушается, онкомаркеры обязательно повышаются. Если они в этот период остаются на старом уровне или повышаются недостаточно сильно – химиотерапия не дала ожидаемого качества. После выписки пациентки наблюдается у доктора на протяжении нескольких лет, периодически сдавая анализы на некоторые онкомаркеры, это помогает оценить состояние здоровья и вероятность рецидива.

Как сдавать анализы

Чтобы не получить ложноположительный итог на онкомаркеры рака молочной железы или отрицательный при раковом заболевании, нужно строго соблюдать рекомендации. Каждый маркер требует особой подготовки, поэтому нужно попросить у врача точные инструкции.

• Обычно перед тестом нельзя кушать, если сдается кровь, то кушать можно за 8-12 часов до анализа. Это необходимо потому, что большинство блюд содержат в своем составе белок, который обязательно попадет в кровеносную систему и повлияет на результат.
• По этим же причинам трое суток нельзя кушать жирное и острое.
• Три дня до анализа запрещены физнагрузки.
• Как большинство анализов онкомаркеры сдаются утром до 10 часов.
• Чрезвычайно важно не употреблять спиртных напитков за трое суток до процедуры.
• Требуется соблюдать половое воздержание в течение недели до анализа.
• Запрещено за сутки пить фармацевтические средства. Если они обязательны, то нужно предупредить врача об этом факте.

Сдавать анализ крови на маркеры онкологии можно в любой день месячного цикла у женщины. Лаборант берет венозную кровь натощак в количество не менее 4мл. Нужно позаботиться, чтобы последний ужин перед анализом был легким и несоленым. Пробирки с биоматериалом в лаборатории обязательно сопровождаются соответствующей маркировкой с ясно читаемыми данными. Результат анализа обычно известен уже на следующий день, интерпретироваться он может только лечащим доктором. При необходимости образцы могут храниться при температуре -20°С.

Когда сдавать

Направляет на исследование онкомаркер только врач. Опухоль в грудной железе – самая распространенная онкология в цивилизованных государствах с высоким уровнем медицины. Чтобы выявить онкологию или наблюдать за пациенткой с уже имеющимся диагнозом, наиболее часто применяются маркеры РЭА и СА15-2. Перед назначением гормонов женщину отправят на определения уровня ER/PR.

Злокачественные образования в груди сложно распознать на раннем этапе. Поэтому, невзирая на не стопроцентную точность опухолевых маркеров, их использование снижает количество летальных исходов. Вторая необходимость использовать онкомаркеры – периодическое обследование пациенток после прохождения курса лечения, чтобы вовремя обнаружить рецидив и избежать образования метастаз в органах.

Когда сдавать ткани на биопсии или кровь на онкомаркеры после первичного приема, решает врач. Обычно он опирается на следующие признаки.

• Перемены в объеме и форме груди.
• Кожа .
• Покраснел участок кожи на груди.
• Втянутый сосок.
• Прощупывается узелки в железе, они плотные и совмещенные с соседними тканями.
• Болезненность железы.
• Быстрый .

Поэтому онкомаркеры сдают в следующих случаях.

• Для ранней диагностики.
• Для выяснения прогноза онкологии.
• Для определения уровня чувствительности организма к фармацевтическим средствам.
• Контроль состояния женщины после оперативного вмешательства.
• Коррекция методики терапии.
• Проверка эффективности лечения.

Опухолевые маркеры отличаются низкой чувствительностью, поэтому их трактовка требует высокой квалификации врача. Онкомаркеры рака молочной железы демонстрируют положительный результат при воспалении и других болезнях. Поэтому специалисты продолжают дискутировать по поводу их использования для прогноза выживаемости. Для хорошего онколога в прогнозе важнее размер образования, поражение лимфоузлов, ее гистология. Намного более полезны маркеры для проверки успешности терапии и раннего обнаружения начала рецидива.

Исследование ткани с помощью специальных реактивов по принципу антиген-антитело. Ki-67 - маркер пролиферативной активности опухолевой клетки. Он оценивается в процентах и показывает, какой процент опухолевых клеток активно делится. Является фактором прогноза опухолевого заболевания и ответа опухоли на химиотерапевтическое лечение. Чем ниже показатель Ki-67, тем хуже опухоль реагирует на химиотерапевтическое лечение (и наоборот). Низкий уровень экспрессии гладкомышечного актина в строме новообразований и в стенках сосудов характерен для низкодифференцированных раков и опухолей с более высоким метастатическим потенциалом.

Состав исследования:

• Гистологическое исследование с определением пролиферативной активности по экспрессии KI-67
• Иммуногистохимическое исследование с определением пролиферативной активности по экспрессии KI-67

Синонимы русские

ИГХ, иммуногистохимическое исследование ткани, исследование образца опухолевой ткани, исследование ткани опухоли.

Метод исследования

Гистологический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Локализация б/м: образец ткани (биоптат) опухолевого образования любой локализации.

Общая информация об исследовании

Антиген Ki-67 представляет собой специфический белок, находящийся в ядерном материале опухолевой клетки, и является необходимым для осуществления ее пролиферации, т.е. деления. Обнаружение Ki-67 указывает на опухолевые клетки, которые находятся в фазе деления клеточного цикла. Это позволяет понять, насколько активно и быстро происходит деление опухолевых клеток, а следовательно, и скорость роста новообразования, оценить риск метастазирования, определиться с тактикой терапии и вероятным ответом на нее, прогнозом заболевания.

Считается, что выявление маркера Ki-67 наиболее показательно при раке молочной железы, однако ряд исследований доказывает целесообразность проведения анализа при раке любой локализации, при подозрении на злокачественный процесс, а также при наличии доброкачественных новообразований с оценкой риска их озлокачествления.

Совместное гистологическое и иммуногистохимическое исследование опухолевого материала позволяет сначала получить морфологическое описание процесса, а затем определить его пролиферативную активность – степень и скорость деления клеток. Это дает достаточно точную и объективную оценку степени злокачественности опухоли и прогноз ее дальнейшего развития.

Гистологическое исследование проводится путем изучения срезов опухолевого материала под микроскопом после предварительного окрашивания, которое позволяет выявить и описать отклонения от нормы в структуре ткани, дать характеристику изменениям и сделать вывод о доброкачественности или злокачественности процесса. Далее проводится иммуногистохимическое исследование (ИГХ), направленное на выявление активности роста опухоли. В ходе ИГХ в образец патологической ткани, имеющей в своем составе клетки с антигенами Ki-67, добавляют специально синтезированные меченые антитела. В процессе реакции образуется комплексы "антиген-антитело", доля которых свидетельствует о количестве клеток, находящихся в активной фазе деления. В заключении указывается индекс Ki-67 – индекс пролиферативной активности, выраженный в процентах. При низких значениях индекса опухоль считается менее агрессивной, при высоких – высокоагрессивной. Также по индексу пролиферативной активности можно судить о возможном ответе опухолевого процесса на терапию, оценить эффективность уже проведенного лечения.

Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование опухолевого процесса является достаточно сложным и трудоемким анализом. Однако объективность и целесообразность его проведения оправдана точными результатами диагностики, наиболее верным выбором терапии и ответом на нее, более качественным прогнозом течения заболевания.

Для чего используется исследование?

• Морфологическое описание опухолевого процесса;
• определение пролиферативной активности (скрытого потенциала деления клеток и увеличения в размерах новообразования);
• верификация наличия опухолевого процесса и его доброкачественности/злокачественности;
• прогноз дальнейшего течения процесса;
• подбор наиболее адекватного и объективного метода лечения/выбор терапии;
• контроль эффективности проведенной терапии.

Когда назначается исследование?

• При наличии ракового процесса любой локализации;
• при наличии доброкачественного образования для исключения озлокачествления;
• при подборе и контроле терапии.

Что означают результаты?

Результат исследования представляет собой морфологическое описание препарата и подсчет количества клеток, имеющих или не имеющих антиген Ki-67. Высчитывается индекс пролиферативной активности (процент клеток с наличием экспрессии белка Ki-67). Интерпретация полученного результата проводится врачом, назначившим исследование, в зависимости от локализации опухолевого процесса, его типа, проведенного лечения и т.д.

• Иммуноцитохимическое исследование соскобов шейки матки с определением белка р16 и Ki 67 (включая жидкостную цитологию – окрашивание по Папаниколау)
• Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование с определением рецепторного статуса Прогестерона и Эстрогена
• Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование с определением пролиферативной активности по экспрессии KI-67, а также риска прогрессирования дисплазии и развития рака шейки матки по экспрессии p16INK4a

Кто назначает исследование?

Литература

• Sales Gil R, Vagnarelli P. Ki-67: More Hidden behind a "Classic Proliferation Marker". Trends Biochem Sci. 2018 Aug 18.
• Du R, Zhang H, Shu W, Chen B, Li Y, Zhang X, Wu X, Wang Z. Correlation between Ki-67 Expression and Hemodynamics of Contrast-Enhanced Ultrasound in Patients with Breast Infiltrative Ductal Carcinoma. Am Surg. 2018 Jun 1;84(6):856-861.

Для верного лечения рака молочной железы необходимо провести множество тестов и анализов, среди которых определение индекса Ki-67. Этот маркер чрезвычайно важен, он позволит составить верный план лечения и определить, как развивается опухоль. Что нужно знать об этом маркере? Как проводится тест? Каковы прогнозы?

Под Ki67 подразумевается антиген раковой опухоли. Его можно увидеть в клетке при ее делении, но если она находится в фазе покоя, то обнаружить этот антиген невозможно. Благодаря этому маркеру можно прогнозировать поведение раковой опухоли. Тест берется с помощью биопсии или оперативным путем, проводится на образце ткани.

Какова роль маркера

Тест на этот вид маркера проводится не только для рака груди, но и для других злокачественных опухолей. Но в большинстве случаев, именно на рак молочной железы приходится основной процент проведённых тестов с Ki-67. Если уровень антигена высокий, то прогнозы неутешительные и опухоль прогрессирует. Если процент Ki-67 большой, то вероятность рецидива увеличивается. Причем независимо от того, как реагирует новообразование на гормональное лечение.

Если после проведенного лечения заболевание снова дает о себе знать и при этом маркер еще выше, то это говорит о том, что нужно комбинировать несколько методов противораковой терапии.

Когда нужно проводить тест

Если онкология агрессивная, то врач назначает тест для того, чтобы убедиться влияет ли уровень антигена на развитие опухоли. Также сдается ряд и других тестов, например на наличие рецептора HER2 - Neu. Данные, полученные со всех тестов дадут основу для составления плана лечения.

Если опухоль растет быстро, меняется, это может служить основанием для проведения теста. Ведь индекс указывает на количество клеток в стадии деления, а чем больше их делится, тем больше становится.

Как делается анализ

Для того чтобы сдать анализ не нужно какой-то специальной подготовки или условий проведения. Берется часть пораженной ткани и окрашивается. Это позволит определить процент клеток, находящихся или готовящихся к делению. Чем больше клеток в стадии деления, тем еще больше их будет.

Методы анализа:

• Результат окрашивания оценивается с помощью световых микроскопов.
• Процент определяется соотношением окрашенных клеток ко всем остальным, при этом интенсивность окраски не имеет никакого значения.
• Метод на 15% был изучен врачами патологоанатом, также применяются рекомендации международных медицинских учреждений.
• Тест проводится с учетом раздела всей опухоли.

Итоги теста определяются процентом, если он равен 0%, то не одна из клеток рака не находится в стадии деления, а значит опухоль развивается очень медленно. Если индекс равен 100%, то значит, что все клетки в стадии пролиферации (деления) и опухоль прогрессирует быстро. Если меньше 20% — опухоль растет медленно, все что больше 20% — быстрорастущая онкология. Индекс также используется для оценки эффективности лечения, если оно удачное, то уровень понижается.

Пролиферативный индекс и его польза

Ki 67 — маркер, который является хорошим показателем нахождения клетки в стадии деления (пролиферации). Именно поэтому индекс называют пролиферативным. Уровень маркера означает соотношение клеток, находящихся в стадии деления ко всем остальным. Зная уровень индекса можно сделать довольно точный прогноз выживаемости.

Если уровень индекса высок, то есть делящихся клеток много, то такой рак хорошо подается химиотерапии. Это связано с тем, что препараты химиотерапии убивают только те клетки, которые находятся в стадии пролиферации, а значит и эффективность их высока. Зная индекс, медики смогут подобрать наиболее эффективный план лечения злокачественной опухоли груди.

Спорные вопросы

Ki-67 маркер при раке молочной железы имеет две стороны медали. С одной стороны, если индекс высокий, то прогноз неутешительный, но зато химиотерапия здесь будет точно эффективна.

Другой спорный вопрос об этом тесте заключается в том, будет ли он полезен при определении необходимости адъювантной химиотерапии.

Если результат теста плохой

Зная, что высокий уровень маркера означает плохой прогноз, у пациентки может появиться серьезное чувство тревоги за собственное здоровье. Но не стоит отчаиваться, ведь медицина имеет множество методов лечения рака даже на самых последних стадиях. И знать результаты анализов необходимо, пусть даже они неутешительные, это позволит назначить адекватное лечение.

Чтобы не падать духом, стоит искать поддержку в семье, также не лишним будет общение с женщинами, больными раком груди. Общение может быть как живым, так и через интернет, это позволит не оставаться со своей проблемой наедине, также можно получить много полезной информации.

Стоит знать и некоторую статистику выживаемости:

• При индексе меньше 10% выживаемость — 95%.
• Если индекс выше 10% выживаемость – 85%.

Вывод: при уровне антигена, приближающемся к 100%, шансов на выживание очень мало. Однако даже на такой стадии рак подвергается лечению. С помощью показаний маркера врач определит точно, как прогрессирует болезнь и найдет наиболее качественный способ лечения. Помните, надежду нельзя терять никогда. Шанс на исцеление есть всегда!

Рак молочной железы, как известно, является гетерогенным заболеванием. Это означает, что одно и то же проявление болезни может быть обусловлено мутациями в разных генах или разными мутациями внутри одного гена. Существует много подвидов заболевания, которые могут быть определены с помощью генетического тестирования или на основе методов с использованием иммуногистохимических анализов.

В мультигенных тестах пролиферация (разрастание клеток) оказывает существенное влияние на прогнозирование риска рецидива заболевания. В дополнение к определению обычных гистологических параметров оценка пролиферации является одним из важнейших факторов для принятия решения о лечении у больных раком молочной железы.

Широкий диапазон методов доступен для оценки разрастания опухолевых клеток, в частности, вычисление митотических фигур в сегментах окрашенных тканей, анализ проточной цитометрии для определения доли клеток, находящихся в фазе роста клеточного цикла, рассмотрение индекса тимидин-маркирования пролиферирующих клеток ядерных антигенов.

Ki-67 представляет собой ядерный белок, связанный с клеточной пролиферацией. Первоначально он был идентифицирован в начале 1980-х годов при исследовании мышиного моноклонального антитела, направленного против ядерного антигена лимфомы Ходжкина. Наиболее распространенным методом анализа антигена Ki-67 является иммуногистохимическая оценки.

Было выявлено, что ядерный антиген Ki-67 экспрессируется в определенных фазах клеточного цикла. Экспрессия генов - это процесс преобразования информации от гена в конечный продукт - РНК или белок. С помощью иммунологического окрашивания с моноклональными антителами Ki-67 можно оценить долю роста популяции опухолевых клеток и выявить прогноз течения болезни.

Методы выявления

Ki-67 является раковым антигеном, который обнаруживается в растущих, разделяющихся клетках, но отсутствует в фазе покоя клеточного роста. Эта характеристика делает Ki-67 хорошим маркером опухоли. Анализ проводится на образце ткани опухоли, чтобы помочь предсказать прогноз роста опухоли.

Тест Ki-67 не рекомендован как обязательный при проведении гистологического исследования опухоли молочной железы. Но при агрессивных формах рака врач может назначить этот тест, чтобы увидеть влияние Ki-67 на рост опухоли. Анализ делается в комплексе с другими исследованиями. На основании общих результатов всех полученных анализов вырабатывается план лечения.

Положительный анализ Ki-67 дает более высокий риск рецидива и худший уровень выживаемости у пациентов с ранними стадиями рака молочной железы. В повседневной клинической работе Ki-67 широко используется в качестве дополнительного фактора для принятия решений по адъювантной (дополняющей хирургическую и лучевую) стратегии лечения.

Опухоль молочной железы с высокими баллами Ki-67 состоит из клеток, которые быстро делятся и растут. Химиотерапевтические препараты высоко эффективны как раз для клеток-мишеней, которые растут за пределами нормальной скорости. Поэтому опухоли с более высоким уровнем Kи-67 хорошо реагируют на химиотерапию. Информация об уровне Ki-67 поможет врачу более точно определить, какое лечение будет работать лучше в данном конкретном случае.

Подготовка к анализу Ki-67 не требует каких-либо специальных условий проведения. Используются стандартные методы подготовки материала для гистологического исследования тканей молочной железы.

Анализ проводят путем окрашивания, что позволяет измерить процент опухолевых клеток, которые являются положительными для Ki-67. Чем больше положительных клеток, тем быстрее они делятся и образуют новые клетки.

При проведении анализа применяют следующие методы:

Значение маркера Ki-67 при раке молочной железы

При раке молочной железы результат Ki-67 менее 10% считается низким, 10-20% пограничным и 20% – высоким.

В таблице 1 показаны средние значения Ki-67 в зависимости от стадии заболевания, размера опухоли и других параметров.

Таблица 1 – Средние показатели Ki-67 в зависимости от различных показателей заболевания

Отсутствие положительной динамики индекса онкомаркера в процессе проводимого лечения говорит о неблагоприятном течении и прогнозе болезни.

Ki67 служит индикатором прогноза остаточного риска у больных раком груди, получавших эндокринную терапию Летрозолом или Тамоксифеном. Использование эндокринной терапии напрямую коррелирует с уровнем Ki-67. Показатель онкомаркера после приема медикаментов рассматривается в качестве индекса резидуального (остаточного) заболевания после проведения лечения.

Динамика изменения индекса в ходе проведения химиотерапии помогает принять решение о ее целесообразности в конкретном случае. Снижение уровня Ki-67 происходит в любом случае проведения неоадъювантной химиотерапии. Отсутствие падения уровня онокомаркера является предвестником неблагоприятного прогноза заболевания.

Prognostic and predictive value of Ki-67 in triple-negative breast cancer
Источник: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5058740/

Это исследование состояло в том, чтобы исследовать прогностическую роль Ki-67 в дальнейшей классификации тройного отрицательного рака молочной железы (TNBC) и проверить, может ли высокий уровень экспрессии Ki67 прогнозировать выгоду от карбоплатина. С января 2004 года по декабрь 2012 года 363 пациента, работавшие для TNBC, были идентифицированы через институциональную клиническую базу данных. После медианного наблюдения в течение 34 месяцев (5,2-120,0 месяца) у 62 пациентов (17,1%) наблюдались рецидивы, а 33 пациента (9,1%) умерли от рака молочной железы. При однофакторном анализе высокий индекс Ki-67, а также больший размер опухоли и вовлечение лимфатических узлов были связаны с более короткой безрецидивной выживаемостью (DFS) и общей выживаемостью (ОС). В многофакторном анализе высокий Ki-67 является независимым фактором риска для DFS (коэффициент риска, RR: 2,835, доверительный интервал 95%, 95% ДИ: 1,586-5,068, P

Тройной негативный рак молочной железы (TNBC) представляет собой подгруппу рака молочной железы, лишенную рецептора эстрогенного рецептора (ER) и экспрессии рецептора прогестерона (PR), а также амплификацию рецептора 2 эпителиального фактора роста человека (HER2). С гистологической точки зрения TNBC является общим иммуногистохимическим (IHC) статусом для ряда опухолей с гетерогенными клиническими проявлениями . Недавнее исследование выявило шесть подтипов TNBC, которые показывают уникальные профили . Учитывая биологическое разнообразие в TNBC, необходимо идентифицировать подтипы с лучшим прогнозом, который может быть использован для интенсивной адъювантной терапии, а также для тех, кто нуждается в более агрессивных полках.

Опухолевая активность, важная клеточная функция, тесно связана с поведением опухолей при раке молочной железы . Разработаны различные методы оценки скорости пролиферации, включая митотический счет, оценку клеточной фракции в S-фазе клеточного цикла и определение IHC связанных с пролиферией антигенов. Ki-67 является одним из наиболее широко используемых антигенов пролиферации IHC и подтвержден как независимый прогностический и прогностический фактор раннего рака молочной железы . Значение Ki-67 является важным параметром при подклассификации просвечивающих опухолей в хорошую прогностическую подгруппу Luminal A и подгруппу Luminal B с плохим прогнозом в соответствии с Международным экспертным консенсусом в Санкт-Галлене . Хотя прогностическая ценность уровня Ki-67 в TNBC пока неясна.

Лечение TNBC было сложным. TNBC, как правило, считается проявляющим более агрессивное клиническое поведение и более высокий риск рецидива опухоли и смертности по сравнению с его неттриппенгативными аналогами. Кроме того, отсутствие четко определенных молекулярных целей делает его хуже, и единственной стратегией лечения являются цитотоксические агенты. Платиновая соль является одним из новых агентов при лечении TNBC. Многие исследователи изучили роль цисплатина и карбоплатина для лечения TNBC в неоадъювантной и метастатической обстановке , в то время как добавление карбоплатина на ранней стадии заболевания по-прежнему не имеет убедительных доказательств. Один важный вопрос заключается в том, должны ли все пациенты TNBC подвергаться воздействию карбоплатина, с его токсическими эффектами и высокой скоростью прекращения лечения; или все пациенты с TNBC получат аналогичные результаты от соли платины .

Цель этого исследования состояла в том, чтобы исследовать роль Ki-67 в дальнейшей классификации TNBC на подтипы с различным прогнозом и может ли уровень экспрессии Ki-67 прогнозировать преимущество TNBC от карбоплатина в условиях адъювантной терапии.

В исследование было включено 363 пациента с TNBC. Средний возраст составлял 55 лет (диапазон 23-86). Двести семьдесят пять пациентов (75,8%) подверглись мастэктомии; 324 (89,3%) пациентов прошли химиотерапию. Схемы химиотерапии включали EC (Эпирубицин 100 мг / м2 IV день 1, Циклофосфамид 600 мг / м2 IV день 1, циклически каждые 21 день в течение 4 циклов), EC-T (Эпирубицин 100 мг / м2 IV день 1, Циклофосфамид 600 мг / м2 IV день 1, циклически каждые 21 день в течение 4 циклов, за которым следует доцетаксел 100 мг / м2 IV в день 1, циклически каждые 21 день в течение 4 циклов), TEC (доцетаксел 75 мг / м2 IV день 1, эпирубицин 75 мг / м2 IV день 1, циклофосфамид 600 мг / м2 IV день 1, циклически каждые 21 день в течение 6 циклов), TC (доцетаксел 75 мг / м2 IV день 1, циклофосфамид 600 мг / м2 IV день 1, циклический каждые 21 день в течение 4 циклов), EC -wPCb (эпирубицин 100 мг / м2 IV день 1, циклофосфамид 600 мг / м2 IV день 1, циклический каждые 21 день в течение 4 циклов с последующим паклитакселом 75 мг / м2 IV день 1, площадь карбоплатина 2 · 0 под кривой, циклическая еженедельно для 12 циклов) и wPCb (паклитаксел 75 мг / м2 IV день 1, площадь карбоплатина 2 · 0 под кривой, циклически каждую неделю в течение 12 циклов). Схемы, содержащие как антрациклин, так и таксаны, были использованы у 177 пациентов (48,8%) и 58 (16,0%) пациентов получали платиносодержащую схему. Сто семьдесят один пациент (47,1%) получил лучевую терапию.

Из 363 тройных негативных опухолей 317 (87,3%) были гистологически идентифицированы как инвазивные протоковые карциномы, 17 (4,7%) в качестве апокринных карцином, 9 (2,5%) в качестве медуллярных карцином, 7 (1,9%) в качестве метапластических карцином, 2 (0,6% %) как инвазивные дольковые карциномы, 3 (0,8%) в качестве нейроэндокринной карциномы, 3 (0,8%) в качестве инвазивной папиллярной карциномы, 2 (0,6%) в качестве аденоцистозной карциномы, 1 (0,3%) в качестве миоэпителиальной карциномы, 1 (0,3%), опухоли злокачественных филлодов и 1 (0,3%) в виде муцинозной карциномы.

Средний уровень экспрессии Ki-67 составлял 40%. С 40% в качестве показателя отсечки индекса Ki-67 196 пациентов (54,0%) были классифицированы как низкая экспрессия Ki-67 и 167 пациентов (46,0%) в качестве высокой экспрессии. Характеристики пациентов в сочетании с уровнем экспрессии Ki-67 описаны в таблице 1. Высокий уровень экспрессии Ki- 67 в TNBC был более распространен в IDC по сравнению с не-IDC (p

После медианного периода наблюдения 34,0 месяца (5,2- 120,0 месяцев) наблюдалось 62 первых события (17,1%), у 24 (12,2%) в группе уровня низкого уровня Ki-67 и у 38 (22,8%) в высоких -выражение уровня (X2 = 11.372, p = 0.001). 62 первых события включали 53 рецидива с 30 локорегионарными рецидивами и 44 отдаленными метастазами и 9 другими событиями с 6 контралатеральными раками молочной железы. Все локальные рекуррентные поражения и контралатеральные повреждения груди были доказаны с использованием либо тонкой иглы аспирации, либо биопсии ядра иглы. Тридцать три пациента (9,1%) умерли во время наблюдения, а пациенты с высокой экспрессией Ki-67 имели более высокий уровень смертности (13,2% против 5,6%, Х2 = 13,368, р

(A) 3-летняя DFS была значительно лучше в группе с низким Ki-67, чем в группе с высоким уровнем Ki-67 (90,8% против 78,4% логарифмического ранга p = 0,001) и (B). Более плохая 3-летняя ОС также была обнаружены в группе высокого Ki-67 (98,0% против 90,4% логарифма р = 0,000).

При однофакторном анализе только высокая экспрессия Ki-67, больший размер опухоли, положительность лимфатических узлов были связаны с более короткими DFS и ОС, тогда как другие клинические патологические характеристики, такие как возраст, гистологический подтип и уровень опухоли, не влияли на прогноз. В многофакторном анализе Ki-67 является независимым прогностическим фактором для DFS (коэффициент риска, RR: 2,835, доверительный интервал 95%, 95% ДИ: 1,586-5,068, P

При анализе 3-летней DFS по распределению Ki-67 анализ STEPP показал возможное положительное действие карбоплатина у пациентов с высокопролиферативной опухолью (Ki-67> 40%) (рисунок 2A). На фигуре 2В и на фигуре 2С представлена ​​наблюдаемая доля DFS соответственно для пациентов с «высоким» и «низким» Ki-67, стратифицированными группой лечения. У пациентов с низким уровнем рака молочной железы Ki-67 использование карбоплатина мало добавляет, если таковые имеются, к 3-летнему DFS (HR: 0,608, 95% ДИ: 0,176-2,103). Тем не менее, пациенты в группе высокого Ki-67, по-видимому, имеют замечательные лучшие 3-летние показатели DFS при лечении карбоплатином (HR: 0,478, 95% ДИ: 0,279-0,819). Взаимодействие между Ki-67 и лечением не было статистически значимым (p = 0,346).

(A) План воздействия на эффект субпопуляции (STEPP) 3-летней выживаемости без болезни. (B) Безрецидивная выживаемость в группе высокого уровня Ki-67 (Ki-67> 40%) в соответствии с обработкой карбоплатином. (C) Безрецидивная выживаемость в группе с низким Ki-67 (Ki-67 ≤ 40%) в соответствии с обработкой карбоплатином. Сообщалось о единичных значениях р-значений критерия рангового рейтинга и коэффициентов опасности (HR) (карбоплатин против некарбоплатина).

TNBC представляет собой группу опухолей с плохим прогнозом из-за агрессивной биологии опухоли и отсутствия целевых агентов . Лучшее понимание его биологического поведения имеет важное значение для улучшения результатов для пациентов TNBC. В этом исследовании мы ретроспективно рассмотрели 363 пациента для анализа корреляции уровня экспрессии Ki-67 с клинико-патологическими характеристиками и прогнозом TNBC. Все пациенты, приходящие из одного центра, гарантировали, что качество теста патологических биомаркеров и решение о лечении в основном стабильны.

Использование Ki-67 в качестве прогностического маркера при раке молочной железы широко исследовано, но лишь несколько исследований исследовали его в тройной отрицательной подгруппе . Некоторые исследователи исследовали прогностическую ценность K-67 во всей когорте рака молочной железы, но число случаев в TNBC и Her2 + было довольно небольшим, и это может ограничить способность Ki-67 идентифицировать клинически различные подклассы. Исследование, проведенное в корейской группе , показало, что высокое предохранение от Ki-67 (≥ 10%) было значительно связано с плохой выживаемостью без рецидива и общей выживаемостью в TNBC, несмотря на более высокую скорость патологического полного ответа (pCR) , Munzone et al. сообщили, что индекс маркировки Ki-67 был связан с различными подгруппами прогноза в отрицательно-отрицательном TNBC с предельным значением 35%. В соответствии с этими результатами наше исследование показало, что высокая экспрессия Ki-67 (> 40%) достоверно коррелирует с худшим прогнозом у пациентов с TNBC, независимо от размера опухоли и состояния лимфатических узлов.

Измерение Ki-67 по IHC является недорогим методом, подходящим для широкого использования в клинической практике . Международная Ки-67 в Рабочей группе по раку молочной железы предложила рекомендации по анализу, отчетности и использованию этого потенциально важного маркера на основе имеющихся данных . В этом исследовании строго соблюдались руководящие принципы, которые гарантировали его ценность. В другом ретроспективном исследовании из нашего центра высокая экспрессия Ki-67 коррелировала с ранним рецидивом в Luminal B / Her2 отрицательном раке молочной железы с предельной величиной 30%. Это может отражать стабильность и надежность теста Ki-67 в одном центре.

Точки отсечения индекса Ki-67, используемые в клинических испытаниях и исследованиях, широко различались , варьировались от 10% до 61%. Поскольку исходные значения Ki-67 для тройных отрицательных и HER2-положительных опухолей намного выше, чем для просвечивающих опухолей , выбор отсечки Ki-67 может быть более очевидным, если бы он рассматривался в каждой подгруппе соответственно. В этом исследовании мы выбрали медиану Ki- 67 как срезающую ценность, которая широко использовалась в других исследованиях . Ввиду изменчивости между наблюдателями и между лабораториями требуется гораздо больше доказательств, чтобы установить соответствующую точку отсечения Ki-67 для TNBC.

Время наблюдения нашего исследования относительно невелико. Однако, несмотря на среднее 34-месячное наблюдение, уровень экспрессии Ki-67 показывает его независимую прогностическую ценность в TNBC. Это может быть связано с ранней репликацией TNBC в течение первых трех лет наблюдения . В этом исследовании 94,3% (50/53) рецидив произошел в первые три года после операции.

Ключевым моментом для использования платинового режима было бы выбор правильного пациента. Существует хорошо описанная связь между TNBC и мутациями зародышевой линии BRCA . Неоадъювантные исследования показали высокие показатели pCR среди ассоциированных с BRCA1 раковых опухолей молочной железы, получавших цисплатин . Однако обычное клиническое применение тестов гена BRCA все еще имеет некоторые трудности. Хотя тест Ki-67 более удобен и экономичен и может быть хорошей альтернативой.

В клиническом исследовании GeparSixto добавление неоадъювантного карбоплатина к режиму таксана-антрациклина значительно увеличивает долю pCR пациентов TNBC. Анализ подгруппы показал, что радиодобаток Odds благоприятствует карбоплатину в группе высокого Ki-67 (> 20%) составляет 1,40 (95% ДИ: 0,968-2,02), что выше, чем в группе с низким Ki-67 (OR: 1,09, 95% ДИ: 0,490 -2,4). Аналогичным образом, наше исследование показало возможное положительное действие карбоплатина у пациентов с высокопролиферативной опухолью (Ki-67> 40%) в адъювантной обстановке. Но эту тенденцию еще нужно проверить в дальнейших перспективных, хорошо сбалансированных исследованиях с большим размером выборки.

Одно из возможных ограничений этого исследования может быть связано с гетерогенностью адъювантной терапии, поскольку не все пациенты получали одинаковый режим. Однако мы можем оценить, что среди пациентов, получавших химиотерапию, большинство (72,5%) получали схему, содержащую антрациклин, и более половины из них (55,6%) получали схемы, содержащие как антрациклин, так и таксаны.

В заключение, TNBC представляется гетерогенной группой с различными клиническими результатами. TNBC с высоким потенциалом распространения следует отслеживать чаще всего в течение трех лет и может быть кандидатом на дополнительные послеоперационные методы лечения с различными механизмами, такими как карбоплатин.

Мы собрали информацию о последовательных пациентах с раком молочной железы, перенесших операцию на грудную клетку в период с января 2004 года по декабрь 2012 года в больнице Шанхая Руиджин, через базу данных по раку молочной железы в Комплексном центре здоровья молочной железы. Протокол был одобрен Этическими комитетами Шанхайской больницы Жуйджин, и все пациенты представили свои письменные информированные согласия участнику этого исследования до того, как были собраны клинические и патологические данные.

Было ретроспективно исследовано 363 пациента с TNBC. Исходные данные, включая возраст, характеристики опухоли (размер опухоли, метастазы в лимфатические узлы, отдаленные метастазы, уровень опухоли, патологическую стадию, экспрессию ER / PR / HER2 и гистологический тип) и хирургическую информацию. Решение о лечении для каждого пациента проводилось на ежедневном междисциплинарном совещании, на котором присутствовали хирурги, медицинские онкологи, радиационные онкологи и патологоанатомы.

Опухоли были классифицированы гистологически в соответствии с классификацией опухолей Всемирной организации здравоохранения . Гистологический класс оценивали в соответствии с системой подсчета Элстона и Эллиса . Окрашивание IHC ER, PR, HER2 и Ki-67 проводилось обычно с использованием системы Ventana BenchMark XT (Ventana Medical Systems, Tucson, AZ). Окрашивание IHC проводили на 4 мкм срезах секций ткани с фиксированным парафином (FFPE) с первичными антителами против ER (SP1, 1: 100, Дако, Дания), PR (PgR 636, 1: 100, Дако, Дания), HER2 (4B5, Roche, Швейцария), K-67 (MIB-1, 1: 100, Дако, Дания). Выражение IHC HER2 оценивали следующим образом: 0 (отсутствие окрашивания или слабое окрашивание мембраны), 1+ (слабое окрашивание мембраны в> 10% опухолевых клеток, неполное окрашивание мембраны), 2+ (слабое или умеренное окрашивание мембран в> 10% опухолевых клеток) и 3+ (однородное, интенсивное окрашивание мембран> 30% инвазивных опухолевых клеток). Тест на флуоресценцию in situ гибридизации (FISH) для амплификации гена HER2 был обычно упорядочен, когда HER2 был IHC 2+. FISH выполняли с использованием набора PathVysion HER-2 DNA FISH Kit (Vysis Inc, Downers Grove, IL) в соответствии с инструкциями производителя.

Все гистологические и IHC-опухолевые слайды оценивались двумя патологами. Гистологические оценки и все биологические особенности оценивались на основе инвазивных компонентов.

Обрезание для положительности ER и позитивности PR было 1% положительных опухолевых клеток с ядерным окрашиванием . Положительным для HER2 было либо усиление IHC HER2 3+, либо FISH (отношение HER2 к CEP17 ≥ 2,0 или среднее число копий HER2 ≥ 6,0 сигналов / ячейка) . Индекс Ki-67 выражался как процент положительно ядерных окрашивающих клеток среди по меньшей мере 1000 инвазивных клеток в районе, набранном. Интенсивность окрашивания не имела значения .

Рецидив рака молочной железы определялся как первая доказанная инвазивная локальная / контралатеральная грудь, региональная или отдаленная рецидив в любом месте . Безрецидивная выживаемость (DFS) определялась как интервал от даты первичной операции до первого рецидива, второго первичного инвазивного рака молочной железы или смерти, относящегося к любой причине. Общая выживаемость (ОС) определялась как время от даты первичной операции до момента смерти независимо от рака молочной железы, связанного или нет.

Все значения p менее 0,05 считались статистически значимыми. Все статистические тесты были двусторонними, с доверительным интервалом 95%. Тест Chi-Square использовался для категоризированных переменных (точный критерий Фишера, когда тест Чи-квадрат был недоступен). Кривые выживания были построены методом Каплана-Мейера. Тест логарифмического ранжирования использовался для определения ассоциаций между отдельными переменными и выживаемостью, моделирования логистической регрессии для изучения связи особенностей опухоли с уровнем экспрессии Ki-67 и регрессионным анализом пропорциональных рисков Кокса для выявления значимых прогностических факторов в TNBC. Статистический анализ проводился в SPSS версии 17.0 (SPSS, Inc., Чикаго, Иллинойс).

Взаимодействие между использованием карбоплатина и K-67 было графически оценено с использованием методологии Pattern of Pattern of Surpopulation (STEPP) . Вкратце, метод STEPP использует подход с раздвижными окнами для определения нескольких перекрывающихся субпопуляций пациентов в соответствии с непрерывным ковариатом, таких как Ki-67, и вычисляет результирующие эффекты лечения, оцениваемые в каждой субпопуляции. Анализ STEPP проводился с программным обеспечением R (http://cran.r-project.org/) с пакетом «STEPP».

Это исследование было профинансировано Национальным научным фондом Китая 81572581. Финансисты не играли никакой роли в разработке исследований, сборе и анализе данных, решении опубликовать или подготовить рукопись. Это расследование было представлено в виде стендовых обсуждений в Конгрессе EMSO Asia 2015, 18-21 декабря 2015 г., Сингапур.